血凝试验-原理,类型,方法,用途

抗原和抗体反应其中抗原抗体复合物以可见的团块形式形成的称为凝集

它发生在细胞或相关成分的表面,因为抗原在它们的表面表达。它发生在不溶性抗原和可溶性抗体之间。

凝集反应有两种类型:

  • 直接凝集:包括滑块凝集,管状凝集,库姆斯的考试、亲和性凝集试验。
  • 被动凝集:它包括乳胶凝集血凝试验和凝血试验。

血凝是一种被动的凝集反应。

血凝试验(HA)是一种以红细胞为载体颗粒的免疫分析方法,常用于各种感染的血清学诊断。

乔治·赫斯特是发现血凝试验的人。他是一位美国病毒学家。

需求

  • 红细胞混悬液:被待检测抗体的特异性抗原或待检测抗原的特异性抗体包裹;因此被称为载体粒子。红细胞可以是人类、绵羊、小鸡等。
  • 血清或血液样本
  • 微量滴定板,如96孔微量滴定(v底)板
  • 稀释剂:磷酸盐缓冲盐水(PBS)
  • 阴性和阳性对照样本
  • RDT试剂盒(通常带有载玻片、试剂和对照)可用于快速血凝试验

的原则红细胞凝集试验

血凝试验的主要主题是什么时候抗原存在于红细胞表面,与任何补体接触抗体反之亦然,它们结合在一起,形成明显的团块,可以清楚地观察到阳性测试和阴性测试的区别。

类型的红细胞凝集试验

根据方法主要有两种类型:

A.快速血凝试验

顾名思义,在大约一分钟内,这种测试可以确定血凝剂的存在。因此,它也可以称为快速诊断测试(RDT)。当检测多个样品时,阴性和阳性对照样品必须只检测一次。

每当进行血凝试验时,必须测试红细胞悬浮液的沉降模式。这是通过将稀释剂与红细胞结合,让它们沉淀下来来实现的。

i.应配发稀释剂。

2加入红细胞,轻轻摇晃使其混合。

3在检查图案之前,让红细胞沉淀下来

iv.检查细胞是否以正常模式设置,是否有自凝集。在微凝集试验中,在快速试验中会有明显的细胞按钮和均匀的悬浮液,没有结块的迹象。

快速血凝试验程序

  1. 将四滴10%的鸡红细胞分别滴在玻片上或试剂盒中提供的玻片上。
  2. 每滴血中加入一滴对照和测试样品,并加入PBS。要分配每个样品,使用不同的尖端,移液管,或一个火焰循环。
  3. 首先,丢下PBS,然后是对照和未鉴定的样本。
  4. 应该通过旋转载玻片或瓦片来混合一分钟。
  5. 观察结果,并与试剂盒中提供的阳性和阴性对照进行比较,分析结果。

B.微量血凝试验

这种方法可用于检测许多胚胎卵尿囊液中血凝素的存在与否。这是一种比RDT更耗时的方法。红细胞溶解在1%的溶液中。细胞在v型底板中沉降更快,阳性和阴性结果的细微差异大于u型底板。

程序摘要分析

  1. 填写一张记录表,记录被测样品的信息。样品和对照品将被放置在这张表所示的孔中。
  2. 用微管取约50毫升的样品,并将其分配到微孔板的一个孔中。每个样品使用不同的尖端,以防止样品污染。
  3. 在其中一个盘子上放置消极和积极的控制。
  4. 每孔倒入50毫升PBS。这些孔将作为红细胞的自动凝集控制。
  5. 在每个孔中注入25毫升1%的红细胞。
  6. 轻轻拍打盘子的两侧搅拌。用盘子盖盖住盘子。
  7. 静置约40分钟,观察/记录数据。

结果解释红细胞凝集试验

在凝集悬浮液的情况下出现结块可表明所有试验均为阳性。可与阳性对照集进行比较分析。阳性测试表明,相应的样品被与病原体相关的抗体或抗原污染。

注:微井可在井底观察到结块,RDT可在井面观察到结块。

红细胞凝集试验
红细胞凝集试验

的应用红细胞凝集试验

  • 它可以用来检测身体对任何疾病或感染因子的体液免疫反应。
  • 它可以用来确定不同的血细胞类型或组。
  • 它可以检测和量化病毒感染,如副粘病毒,流感等。
  • 设计了不同的基于血凝的快速诊断检测试剂盒。例如,在乙型肝炎感染情况下检测HbsAg的RDT试剂盒。
  • 它还可以检测各种细菌感染,如梅毒。

的优点红细胞凝集试验

  • 操作简单
  • 不像其他测试那么贵
  • 所使用的设备类型通常很容易获得。
  • 结果的快速解释(如RDT的情况)

的局限性红细胞凝集试验

  • 孵育时间和RBC浓度的错误可能导致错误的结果。
  • 在反应中考虑的不同因素必须是特定的。它们的非特异性可能导致错误的结果。
  • 定量值的确定和结果的解释需要有资质的人员。
  • 结果解释是手工进行的,没有任何数字数据,因此不同的观察者在分析时可能会有误差或波动。

参考文献

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关于作者

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比卡已经受理

Bikash Kumar Dwivedi在尼泊尔加德满都的圣泽维尔学院获得微生物学学士学位。他从事分子生物学和医学微生物学研究,为人类造福。他对抗生素耐药性、免疫学和疾病流行病学领域感兴趣。

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