维达尔试验-目的，原则，程序，类型，结果，优点和局限性

• 维达尔试验是一种凝集试验，用于检测病人血清中产生的抗肠热病病原体的抗体(沙门氏菌Typhi和沙门氏菌Paratyphi A，B和C）。
• 它是用于毒液诊断伤寒和副伤寒的常见方法之一，尤其是在地方性区域。
• 该测试由Greembaum和Georges Ferdinand于1896年延长开发，用于诊断人类的肠溶热。
• 持续抗体相互作用以检测伤寒患者血清样品中的特异性抗体。使用的抗原衍生自细菌细胞沙门氏菌Typhi和沙门氏菌帕拉伐。
• 沙门氏菌Typhi在鞭毛上具有o抗原和鞭耳的H抗原。相似地，沙门氏菌Paratyphi A和S.almonella.Paratyphi B还在其细胞壁上具有抗原，但分别在其壁炉中具有αh和bh抗原。
• 在感染时，这些抗原刺激身体产生特定的抗体，并在血液中释放出来。这些针对抗原的特异性抗体可在患者感染(发烧)6天后的血清中检测到。

持续测试的目的

进行测试以检测血清抗体沙门氏菌Typhi和沙门氏菌副伤寒辅助疑似患者的肠热病诊断。

持久原则

个人感染了沙门氏菌Typhi或者S.。帕拉替氏症产生针对体细胞（O）抗原和/或鞭毛抗原（H）的抗体。这些产生的血清中的抗体，如果暴露于携带同源抗原的细菌悬浮液，导致凝集。凝集反应可以被视为可见的块状物。

在测试中，患者的血清与杀死的细菌悬浮液混合沙门氏菌携带特定的O，H，AH和BH抗原并观察到凝集反应。如果患者的血清含有针对抗原的特异性抗体，则显而易见的是，表明阳性测试。没有凝集表明阴性结果。

持续持续测试要求

新鲜血清，含有沙门氏菌抗原（O，H，Ah和Bh抗原）的试剂盒，阳性控制，持卡或载玻片，涂抹器棒。

持续程序

维达尔测试可以通过两种方式进行-

1. 快速幻灯片测试：它可能是定性的或定量的，并在幻灯片上进行。
2. 管试验:它是在试管中进行的，是定量的，需要孵育。它被认为比滑动试验更可靠。

幻灯片测试

1. 将一滴阳性对照液滴在载玻片的一个反应圈上。
2. 移液管在下一个反应髓鞘上一滴等渗盐水。（阴性对照）。
3. 用移液管滴一滴待检测的病人血清到剩下的四个反应圈上。
4. 在前两个反应圈中加入一滴维达尔TEST抗原悬液' H '。(电脑& NC)。
5. 在剩下的四个反应环上分别加1滴O、H、AH和BH抗原。
6. 用单独的混合棒均匀地将每个圆圈混合在整个圆圈上。
7. 轻轻地前后摇动滑块，在一分钟内宏观观察是否有凝集现象。

半定量方法

1. 将一滴等渗盐水移移到第一反应圆圈中，然后将5,10,20,40,80μl的测试样品放置在剩余的圆圈上。
2. 加入每个反应圈，一滴抗原，其显示在筛选方法中与试验样品凝集。
3. 使用单独的搅拌棒，将每个圆的内容均匀地混合在反应圆上。
4. 摇滚滑块来回来回摇摆;观察到一分钟内宏观凝聚。

标准管试验方法

在维达尔试验中，最初使用了两种类型的管:
（1）Dreyer的管子（窄管与锥形底部）用于H粘合和
（2）菲利克斯管(短圆底管)用于O凝聚。

现在，3×0.5毫升Kahn管用于两种类型的凝集。

1. 取4组8康管/试管，标记为1 ~ 8进行O、H、AH、BH抗体检测。
2. 移液管进入管中的管道1号1.9ml等渗盐水中。
3. 在剩余的每根(2至8根)中加入1.0 ml等渗生理盐水。
4. 在每根中的管1号管中加入0.1ml待测试的血清样品并混合良好。
5. 从第1号试管中转移1.0 ml稀释血清。1至tube号2and mix well.
6. 将1.0ml从管1号稀释的样品转移到管号3中并混合良好。继续这种串联稀释，直到每组中的管号7。
7. 从每组的管道7中丢弃1.0ml稀释的血清。
8. 所有组中的管号8，用作盐水控制。现在，在每套中达到血清样品的稀释如下：管号：1 2 3 4 5 6 7 8（对照）稀释液1:20 1:40 1:80 1：160 1：320 1：640 1：1280。
9. 每组的所有试管(1至8)从试剂瓶中分别加入1滴WIDALTEST抗原悬液(O, H, AH和BH)并混合均匀。
10. 盖上试管，37°C孵育过夜(约18小时)。
11. 轻轻地取出沉淀的按钮，观察是否凝集。

以上协议从WIDAL TEST: Swemed Diagnostics获得

结果解释持续持久测试

积极的：一分钟内凝集

消极的：无凝集，表明患者血清中相应抗体无临床显著水平。

• O凝集滴度为1:100或以上、H凝集滴度为1:200或以上的样品应视为具有临床意义(活动性感染)。
• 两者之间的4倍上升的示范是诊断。
• H凝聚比O凝聚更可靠。
• 在第1周结束时血清出现在血清中，在第2周和第3周的急剧上升，滴度仍然稳定，直到第4周才会下降。
• 抗体滴度上升比阳性测试更能证明感染。最好间隔7至10天对两份血清标本进行检测，以显示抗体滴度上升。
• 低抗体滴度在正常个体中是常见的，并且没有表明感染。

维达尔测试的优点

1. 这是一种快速检测，用于筛选流行区域的肠溶热。
2. 当不可用文化设施时，持续持续的持续测试。
3. 它可以检测由沙门氏菌和沙门氏菌帕拉伐氏症引起的感染。

持续持久测试的局限性

1. 这只是一种推测性试验，不能仅根据维达尔试验来确定诊断。
2. 必须在指定的时间内进行测试，只有在疾病的7天内和4周后的测试通常是负的。
3. 由于低抗体滴度在正常的个体中常见，因此应根据健康局部群体的基线滴度来解释持久测试。
4. 定量测试可能需要很长时间才能完成。
5. 在以前接种过疫苗或感染过流感病毒的患者中，维达尔检测可能呈假阳性S..Typhi。
6. 由于交叉反应或其他非沙门氏菌感染，如斑疹伤寒、免疫疾病或慢性肝病，假阳性反应可能是常见的。因此，目前更可靠的诊断方法，如血液培养。
7. 除了与其他的交叉反应沙门氏菌这种测试不能区分目前的感染和以前的感染，也不能区分伤寒疫苗。
8. 世界卫生组织(世卫组织)表示，由于多种因素可能影响维达尔检测的结果，最好不要过于依赖这种检测。

参考

1. Kenneth E.Sanderson，Shu-linliu1，Letang和Randal N.Johnston。（2015）.salmonella typhi和沙门氏帕拉伐氏A.分子医学微生物学（2 EDS）。（2）：1275-1306。
2. 宋jh，park m，na ds，moon hb，pai ch。PCR检测伤寒伤寒患者血液中的沙门氏菌Typhi。J Clin Microbiol 1993; 31：1439-1443。
3. Parry CM, Hien TT, Dougan G, White NJ, Farrar JJ。伤寒。中华医学杂志2002 (347);22:1770 - 1782。
4. https://microbiologyinfo.com/widal-test-introduction-princifle-procedure-interpretation-and-limitation/
5. http://www.onlinebiologynotes.com/widal-test-introduction-princifle-procedure-result-interpretation-applications-andimitations/
6. https://microbreononline.com/widal-test-princifle-procedure-results/
7. https://laboratoryInfo.com/widal-test-princifle-procedure-result-interpretation-and -limitations.