贝尔德帕克琼玛

  • Baird Parker Agar由Baird Parker从Zebovitz等人的碲酸盐制剂开发,用于分离和枚举食品和其他材料中的葡萄球菌,因为它允许凝结酶阳性菌株的良好分化。
  • 加入丙酮酸钠作为选择性生长兴奋剂,蛋黄乳液作为分化剂。培养基允许增长金黄色葡萄球菌并选择性地抑制大多数其他细菌的生长。
  • 因此被认为是一种选择性和诊断培养基,用于食物中的凝固酶阳性葡萄球菌的分离和枚举。

贝尔德帕克琼玛

Baird Parker琼脂的组成

原料 GMS /升
Tryptone 10.000
HM Peptone B# 5.000
酵母抽提物 1.000
甘氨酸 12.000
嘌呤钠 10.000
氯化锂 5.000
琼那 20.000

最终pH(25°C)7.0±0.2

贝尔德帕克琼的原则

  • 在凝血酶试验和该培养基中存在透明脂肪区的透明区域之间的存在性高的相关性,这是由于蛋白质的卵泡酶,蛋黄。
  • 近100%的凝固酶阳性葡萄球菌能够减少产生黑色菌落的碲酸盐,而其他葡萄球菌不能总是这样做。
  • Tryptone,HM蛋白胨B和酵母提取物是氮气,碳,硫和维生素的来源。丙酮酸钠不仅保护受伤的细胞并有助于恢复,而且还刺激金黄色葡萄球菌生长而不会破坏选择性。
  • 氯化锂和钾碲酸盐抑制除了金黄色葡萄球菌之外的大部分污染的微生物群。
  • 碲酸盐添加剂对蛋黄清洁菌株毒性而不是S.aureus,并赋予菌落的黑色。
  • 甘氨酸,丙酮酸增强葡萄球菌的生长。
  • 随着蛋黄的添加,培养基变为黄色,不透明。蛋黄添加剂除了提供富集外,还通过证明卵磷脂酶活性(蛋黄反应)辅助鉴定过程。
  • 该培养基上的透明区域和灰色黑色菌落是凝固酶阳性葡萄球菌的诊断。在进一步温育后,围绕菌落开发的不透明区,这可能是由于脂溶性活性。

贝尔德帕克琼脂的制备及使用方法

  1. 悬浮在950毫升蒸馏水中的63.0克。
  2. 热量沸腾以完全溶解培养基。
  3. 通过在15磅压力(121℃)的高压灭菌15分钟的灭菌15分钟。
  4. 冷却至50°C,无菌加入50ml浓缩蛋黄乳液和3ml无菌3.5%碲酸钾溶液(FD047)或50ml蛋黄碲酸盐乳液(FD046)。
  5. 有关额外的选择性,如果需要,请加入1 Vial的BP Sulpha补充剂的再水解含量。
  6. 或者,每90mL培养基可以使用1个纤维蛋白原血浆胰蛋白酶抑制剂补充剂,代替蛋黄碲酸盐乳液,用于鉴定凝固素,阳性葡萄球菌。
  7. 混合良好,倒入无菌培养皿。
  8. 在使用前干燥琼脂平板的表面最小的一段时间。
  9. 用玻璃刮刀,在琼脂表面上的缓冲蛋白水中涂抹0.1ml等分试样的样品稀释液,直至其干燥。较大的菜肴可使用高达0.5ml。
  10. 在35℃下孵育倒置盘。
  11. 24小时后检查,寻找典型的殖民地金黄色葡萄球菌
  12. 再孵育阴性培养物24小时。

结果解释贝尔德帕克琼脂

黑色,凸起的闪亮菌落1-1.5mm的直径是一个推定的阳性测试S.金黄色葡萄球菌。不形成黑色色素沉着的菌落应被解释为阴性。

生物 生长
金黄色葡萄球菌 灰黑闪亮。殖民地周围的正不透明区域
Proteus mirabilis. 棕色 - 黑色,卵磷脂酶阴性
单调叶黄素 棕黑色(非常小),对卵磷脂酶负阴影
葡萄球菌表皮 黑色,卵磷脂酶负阴性
枯草芽孢杆菌 黑褐色亚光,卵磷脂酶阴性
大肠杆菌 大棕黑色,卵磷脂酶阴性
葡萄球菌皂霉菌 不规则,可能会产生清除。可以在24小时内生产宽不透明区域
酵母 白,对卵磷脂酶负阴性

使用Baird Parker Agar

  • 建议从食物和临床样品中分离和枚举凝固酶阳性葡萄球菌。
  • 贝尔德帕克琼的使用是​​由AOAC国际正式采用的,建议在USP中用于微生物限制测试的性能。
  • ISO委员会还推荐了这种培养基用于葡萄球菌的分离和计量。
  • 贝尔德帕克琼脂也可用于通过添加纤维蛋白原血浆来检测凝固酶活性。

贝尔德帕克琼的局限性

  • 身份的金黄色葡萄球菌孤立在贝尔德帕克琼琼必须用凝血酶反应确认
  • 虽然建议培养基检测凝固酶阳性金黄色葡萄球菌,其他细菌可能会生长。
  • 此外,必须进行生物化学测试以进行确认。
  • 生长在凝固酶阳性菌落附近的一些污染物的菌落可以部分消化凝固酶卤素反应。

参考

  1. http://himedialabs.com/td/m043.pdf.
  2. http://www.oxoid.com/uk/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=cm0275&
  3. ISO 11133:2014食物的微生物学,动物饲料水制备,生产,储存和培养媒体的性能测试
  4. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/content/hugo/baird-parkeragar.htm.
  5. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0079635203800309.

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