MRS肉汤试验-原理、程序和结果

MRS Broth试验的目的

  • 用于实验室环境下乳酸菌的培养和计数
  • 测定生物在葡萄糖发酵过程中产生气体的能力

MRS Broth试验原理

MRS Broth是一种改良的乳酸菌培养基,它支持乳酸菌良好的生长,对于在其他一般培养基上生长不良的一些挑剔的菌株特别有用。它最初是由De Man, Rogosa & Sharpe在1960年开发的,该培养基可用于对MRS Agar上分离的生物体的确认试验。它含有动物组织、牛肉提取物和酵母提取物的酶消化,这些都是用于满足MRS Broth培养基中一般生长要求的碳、氮和维生素来源。葡萄糖是培养基中含有的可发酵的碳水化合物。肉汤中的醋酸钠是一种抑制剂。乙酸钠和柠檬酸铵作为能量来源,以及通过污染生物体防止过度生长的选择剂。磷酸钾是缓冲剂。硫酸镁和硫酸锰提供用于代谢的阳离子。聚山梨酯80是一种表面活性剂,促进乳酸菌对营养物质的吸收。培养基上的浑浊度表明了微生物的生长,糖发酵过程中产生的气体由培养液中达勒姆管上的气泡表明。

MRS肉汤试验使用的培养基

葡萄糖 20.0通用
动物组织的消化 10.0通用
牛肉膏 10.0通用
酵母提取物 5.0通用
醋酸钠 5.0通用
磷酸二钠 2.0通用
柠檬酸铵 2.0通用
聚山梨酯80 1.0通用
硫酸镁 0.1通用
硫酸锰 0.05通用

最终pH 6.5 +/- 0.3在25ºC。

MRS Broth试验程序

  1. 将MRS肉汤接种18至24小时的微生物培养物。
  2. 在环境空气中35°-37°C孵育试管24至48小时。
  3. 检查试管的浊度和产气量。

结果MRS Broth试验解释

结果MRS Broth试验解释

积极的测试:乳酸菌sp . -生长(介质浑浊),无气体产生

积极的测试:明串珠菌属生长,由达勒姆管中的气泡显示的气体生产

负面测试:无浑浊(无生长),无产气

MRS Broth试验的局限性

  • 由于营养需求的不同,有些菌株可能会在这种培养基上生长不良或不能生长。
  • 乳酸菌以外的其他生物也可以在这种培养基中生长。分离株必须通过适当的生化试验确认为乳酸菌。

MRS肉汤试验的质量控制

乳酸菌酵母(ATCC9338) -生长,气体在达勒姆管

嗜酸乳杆菌(ATCC4356) -生长,达勒姆管无气体

铜绿假单胞菌(ATCC 27853) -没有增长

参考文献

  1. Tille 2014点。贝利和斯科特的诊断微生物学。13版。Mosby, Inc.是Elsevier Inc. 3251 Riverport Lane的子公司。圣路易斯。密苏里州63043
  2. 默克微生物手册,第12版。汤夫人。
  3. Scharlau实验室。汤夫人的艺术。02 - 135。http://www.scharlabmagyarorszag.hu/katalogus/02-135_TDS_EN.pdf
  4. 是Neogen Corporation的子公司。乳酸菌MRS Broth (7406)http://foodsafety.neogen.com/pdf/acumedia_pi/7406_pi.pdf

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