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Immuno-diffusion是一种检测或测量抗体和抗原沉淀的技术,包括通过琼脂或琼脂糖等物质扩散。简单地说,它表示凝胶中的沉淀。
它是指用于在抗体和其特定抗原之间获得沉淀物的任何技术。
这可以通过:
- a)悬浮在凝胶中的抗原/抗体并让另一个通过它从井中迁移或,
- b)使抗体和抗原均通过凝胶从单独的孔中迁移,使得它们形成沉淀面积。
基于所采用的方法,免疫扩散可能是:
- 径向免疫分解
- ochterlony双重扩散
放射免疫扩散(去掉)或曼奇方法也被称为曼奇尼免疫扩散或单径向免疫分离性测定.它是一种单扩散技术,将含有抗原的溶液放入均匀浸渍抗体的凝胶或琼脂表面的孔中。作为抗原抗体反应的结果,在井周围沉淀的环的直径与溶液中抗原的数量相对应。
径向免疫影响的目标
Mancini Immunoxiffusion测试可以用以下一个或多个目的进行:
- 检测抗原 - 抗体复合物。
- 描述抗原 - 抗体复合物沉淀出的情况。
- 确定抗原的相对浓度。
放射免疫扩散原理
径向免疫扩散是沉淀反应的一种。因此,这是基于沉淀素曲线的原理,即当抗原和抗体的适当比例存在时,抗原-抗体相互作用形成可见的交联沉淀。在试验中,抗体被加入到琼脂中,并倒入玻璃板中形成一个均匀的层。在琼脂上切出圆形孔,并将抗原引入孔中。浸渍抗体的特异性抗原从孔的各个方向扩散到琼脂,并与存在的抗体反应,形成可见的沉淀或沉淀环。从井周围集中形成的环状沉淀物带指示了反应。所形成的沉淀环的直径,对应于溶液中抗原的量。
放射免疫扩散程序
- 将含有合适的抗血清(抗体)的琼脂倒入平板中。
- 小心地切割并从板中取出并取出。
- 含有已知抗原浓度的单一或一系列标准品被放置在单独的孔中,而对照组和“未知”样本则被放置在其他孔中。
- 当抗原呈放射状扩散时,在最佳抗原-抗体浓度区域会形成一圈沉淀。
- 测量并记录环的直径。
- 使用标准的环直径与其浓度相比,制备标准曲线。然后使用该曲线来确定对照和未知样品的浓度。
结果放射免疫扩散解释
- 抗原孔周围沉淀环的存在表明特异性抗原-抗体相互作用。
- 没有沉淀素环表明没有反应。
- 井中的抗原量越大,环的较为越来越远的井。
径向免疫分离的应用
- 免疫扩散技术主要用于免疫学中,以确定样品中抗原的量或浓度。
- 血清免疫球蛋白分类的估计。
- 血清血清中IgG,IgM抗体的估计。
其他应用程序包括:
- 确定血清中抗体的相对浓度。
- 测定血清转铁蛋白和α -铁蛋白。
- 比较两种不同抗原的性质。
- 确定抗原制剂的相对纯度
- 疾病诊断
- 血清学调查
径向免疫分离的优点
- 诱导凝胶中的沉淀,以提供比其他方法更具体和敏感的结果。
- 反应是沉淀带的形式,可以染色以更好地查看和保存。
- 如果存在大量抗原,每次抗原-抗体反应都会产生单独的沉淀线。
- 该技术还表明了不同抗原之间的身份,交叉反应和非同一性。
放射免疫扩散的局限性
- 长反应时间(18-48小时)
- 还提出了甘露尼尼的测试结果受试验样品(蛋白质)中存在结合的金属阳离子的影响。
- 沉淀的单个扩散灯泡被认为比其他方法相对浪费。
- 该试验最近被更敏感和自动化的方法所取代,例如Nephelometry和酶联免疫吸附试验。
参考文献
- 斯蒂芬·e·Ritzmann;放射免疫扩散再现。第一部分,检验医学,第9卷,第7期,1978年7月1日,第23-34页。
- https://www.slideshare.net/prashanthkumarguddeti/antigen-antibody-interactions-63139960
- Lydyard,下午,Whelan,A。,Fanger,M.W。(2005).immunology(2 ED)。伦敦:BIOS科学出版商。
- Parija南卡罗来纳州(2012)。微生物学与免疫学教科书。(2)。印度:爱思唯尔印度。
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