表的内容
Lowenstein Jensen (LJ)媒体公司是一种选择性培养基,通常用于培养和分离分枝杆菌,特别是结核分枝杆菌从临床标本。LJ培养基最初由洛温斯坦他用刚果红和孔雀石绿来抑制有害细菌。目前的配方包括一种以鸡蛋为基础的甘油培养基,并以Jensen的修改为基础。Jensen通过改变柠檬酸盐和磷酸盐的含量,消除刚果红染料,增加孔雀石绿的浓度来改进Lowenstein的培养基。Gruft进一步对L. J. Medium进行修饰,加入青霉素、萘啶酸和核糖核酸(RNA)以增加选择性。这种培养基支持多种植物的生长分枝杆菌也可用于烟酸检测。
Lowenstein Jensen (LJ) Media的组成
成分 | 量 |
土豆粉 | 30.0通用 |
L -天冬酰胺 | 3.6通用 |
磷酸二氢钾 | 2.4通用 |
柠檬酸镁 | 0.6通用 |
孔雀石绿 | 0.4通用 |
硫酸镁 | 0.24通用 |
甘油 | 12毫升 |
蛋基地 | 1000毫升 |
Lowenstein Jensen, Gruft Modification与LJ Medium相同,添加了:
萘啶酸 | 56.0毫克 |
青霉素 | 52.8毫克 |
核糖核酸 | 0.05毫克 |
Lowenstein Jensen (LJ) Media的原则
L-Asparagine和土豆粉是氮和维生素的来源。磷酸二氢钾和硫酸镁促进生物体生长,起到缓冲作用。孔雀石绿在鼓励分枝杆菌生长的同时,阻止了大多数污染物的生长。蛋悬挂提供分支杆菌代谢所需的脂肪酸和蛋白质。当加热时,卵清蛋白凝结,从而提供一个固体表面接种。甘油对人型结核杆菌生长有利,对牛型结核杆菌生长不利。
在Gruft法,青霉素和萘啶酸以及孔雀石绿阻止了大部分污染物的生长,同时促进了分枝杆菌的早期生长。RNA起着刺激和帮助的作用以提高分枝杆菌的分离率。
Lowenstein Jensen (LJ)培养基的制备
- 将37.3 g的培养基溶解在600毫升含有12毫升甘油的纯净水中。
- 加热并频繁搅拌使介质完全溶解。
- 121°C高压灭菌15分钟。
- 在无菌条件下准备1000毫升均匀的新鲜鸡蛋悬浮液。在收集和混合过程中,避免将空气搅入悬浮状态。
- 将1000ml鸡蛋悬浮液与600ml无菌Lowenstein-Jensen培养基无菌混合,冷却至50 - 60°C,避免气泡。
- 将完成的培养基倒入无菌的螺旋盖试管中。将试管倾斜放置,在85°C加热45分钟。
Lowenstein Jensen (LJ) Media的结果解释
- 培养物应在接种后5至7天内阅读,此后每周阅读一次,持续8周。
- 典型的菌落无色素,粗糙,干燥在LJ培养基上。
- 介质的绿色是由于孔雀石绿的存在,孔雀石绿是防止大多数其他污染物生长的选择剂之一。
- 快速种植在7天内就能形成成熟的菌落;慢的种植者需要超过7天的成熟菌落形式。
- 颜料生产:
- 白色、奶油色或浅黄色=不显色(NC)
- 柠檬,黄色,橙色,红色=显色(Ch)
使用Lowenstein Jensen (LJ)媒体
- 它用于分枝杆菌感染的诊断。
- 用于检测菌株对抗生素的敏感性。
- 它还用于区分不同种类的分枝杆菌(通过菌落形态,生长速率,生化特性和显微镜)。
Lowenstein Jensen (LJ) Media的局限性
- 建议对纯培养的菌落进行生化和/或血清学试验以完全鉴定。
- LJ培养基需要在5-10%的CO2气氛中培养,以恢复分枝杆菌。由于未知的原因,分枝杆菌无法从蜡烛消光瓶中很好地恢复。
- 阴性培养结果不能排除分枝杆菌的活动性感染。
- 由于营养成分的变化,可能会遇到一些菌株在这种培养基上生长不良或不能生长。需要进一步的测试来确认分枝杆菌spp。
- 由于孔雀石绿的光敏性很强,应保护介质不受任何光源的照射。
参考文献
- https://en.wikipedia.org/wiki/L%C3%B6wenstein%E2%80%93Jensen_medium
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/LJMedia.htm
- http://himedialabs.com/td/m162.pdf
- https://microbeonline.com/preparation-uses-lowenstein-jensen-lj-medium/
- https://laboratoryinfo.com/lj-medium/
- http://legacy.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/8011670 (02) . pdf
- Naveen, G., & Peerapur, B. V.(2012)。从临床标本中分离结核分枝杆菌(MTB)的Lowenstein-Jensen培养基、Middlebrook 7H10培养基和MB/BacT的比较临床与诊断研究杂志 :JCDR,6(10) 1704 - 1709。http://doi.org/10.7860/JCDR/2012/4603.2635
我对LJ蛋基培养基的有效期感到困惑。
请问我能知道正确的有效期吗?
这篇文章读起来不错。谢谢。