平板计数琼脂(PCA)

平板计数琼脂(PCA)是一种细菌学底物,用于测定样品中活的、需氧的细菌总数。它不是一种选择性的媒介。细菌的数量用菌落形成单位每克(CFU/g)、固体样品和液体样品每毫升(CFU/ml)表示。推荐的技术是把板技术.将样品稀释,并在培养皿中加入适当的稀释倍数。将无菌的熔融琼脂添加到这些培养皿中,轻轻旋转培养皿以确保样品与琼脂的均匀混合。培养皿在20或30°C下孵育3天。孵育后,在培养皿上以25-250个菌落计数菌落数量,认为得出的结果最准确。在计算样品中实际细菌数量时,应考虑稀释系数。

平皿计数琼脂

平板计数琼脂的组成

成分

Gms / L

酪蛋白/胰蛋白胨的酶消化 5.0
酵母提取物 2.5
葡萄糖 1.0
琼脂 15.0

最终pH 7.0±0.2在25°C

平板计数琼脂的制备

  • 悬浮在1000ml蒸馏水中的23.5克。
  • 热量沸腾以完全溶解培养基。
  • 在15磅压力(121°C)下用高压灭菌15分钟。
  • 冷却至45 - 50°C。
  • 充分混合后倒入无菌培养皿。

平板计数琼脂原理

平板计数琼脂也称为胰蛋白胨葡萄糖酵母琼脂或酪蛋白-蛋白胨葡萄糖酵母琼脂。培养基中含有酪蛋白的酶消化,为有机体的生长提供氨基酸、氮、碳、维生素和矿物质。酵母提取物主要提供复合b族维生素。葡萄糖是一种可发酵的碳水化合物,为细菌的生长提供能量来源。琼脂是固化剂。

板块计数琼脂

计数所有培养皿中15-300个菌落。考虑到稀释因素,液体样品按CFU/ml计数,固体样品按CFU/g计数。

枯草芽孢杆菌=生长,稻草色菌落
大肠杆菌=生长,稻草色菌落
金黄色葡萄球菌=生长,稻草色菌落

平板计数琼脂的用途

  • 平板计数琼脂用于计数食品、水和其他重要卫生物质中的细菌。
  • 也适用于无菌室的细菌计数计数。

平板计数琼脂的限制

  • 建议对纯培养的菌落进行生化、免疫学、分子或质谱检测以进行完全鉴定。
  • 平板计数琼脂是一种通用的培养基,可能不支持挑剔的生物体的生长。

参考

  1. Himedia
  2. Neogen食品安全
  3. 默克
  4. 赛默费雪科学公司
  5. 哈代诊断
  6. 罗纳德·m·阿特拉斯和詹姆斯·w·斯奈德(2014)。临床和公共卫生微生物学媒介手册。CRC出版社。Taylor & Francis Group, LLC。

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