淀粉水解试验-目的，原理，步骤和结果

淀粉水解试验的目的

• 测定生物体水解淀粉的能力。
• 根据生物用α-淀粉酶水解淀粉的能力来区分它们。
• 它有助于来自属的物种的分化棒状杆菌，梭菌，芽孢杆菌，拟杆菌，梭杆菌，以及肠球菌．

淀粉水解试验原理

淀粉是一种复杂的碳水化合物（多糖），由两个组分组成，由200-300个葡萄糖单元的直链聚合物，和淀粉络蛋白，较大的支链聚合物基团。两种直链淀粉中的α-D-葡萄糖分子通过1,4-α-糖苷（缩醛）键合键合。两种形式的不同之处在于，支链淀粉含有多糖侧链，在主链中连接到大约每30个葡萄糖。这些侧链与主链相同，不同之处在于侧链中第一葡萄糖的数量碳与主链葡萄糖的碳数6键合。因此，键是1,6-α-糖苷键。淀粉太大而不能穿过细菌细胞膜。因此，对细菌的代谢值是必须首先分裂成较小的片段或单个葡萄糖分子。产生和分泌细胞外酶α-淀粉酶和寡核苷酸酶和寡核苷酸酶的生物能够通过将糖亚基之间的糖苷键分解成麦芽糖，二糖和一些单糖如葡萄糖来水解淀粉。这些二糖和单糖通过半透膜进入细菌细胞的细胞质，从而通过内吻液使用。

淀粉酶在某些细菌中是已知的，而在真菌中则是众所周知的。降解淀粉的能力被用作测定微生物产生淀粉酶的标准。在实验室环境中，通过淀粉水解测试或淀粉测试来确定淀粉酶的存在或不存在。该试验利用碘作为指示剂。含有碘的淀粉在培养基中产生深蓝色，因为碘被困在淀粉的螺旋结构中，而蓝色培养基中菌落周围的黄色区域或透明区域表明淀粉水解活性。透明区表明淀粉水解成单糖，单糖不能与碘分子结合，并在细菌生长周围出现透明区。透明区大小与所研究菌株的淀粉水解活性成正比。

淀粉水解试验的程序

1. 用无菌技术，制造一个条纹接种在标记板中心接种待测试的有机体
2. 将接种过的细菌在37℃下孵育48小时。
3. 孵育后，用滴管滴入碘溶液，冲洗盘子表面30秒。
4. 倒掉过量的碘。
5. 检查细菌生长系列周围的透明区域。

结果解释淀粉水解试验

阳性测试：加入碘溶液后，生长线周围有一个清晰的区域。

负面测试：介质呈深蓝色

淀粉水解试验的质量控制

大肠杆菌ATCC25922-阴性反应，未清除。

枯草芽孢杆菌ATCC6633-阳性反应清除周围菌落。

参考

1. Tille下午2014.贝利和斯科特的诊断微生物学。十三个版本。Mosby，Inc。是elsevier Inc.3251 Riverport Lane的联盟。圣路易斯。密苏里州63043
2. Sigmon j . 2008。淀粉水解试验。http://www.asmscience.org/content/education/imagegallery/image.3172
3. Aneja K.R.2003.微生物学，植物病理学和生物技术，第四个修订版，新时代国际（P）Limited，Ansari Road，新德里-110002。

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