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奥沙宗试验定义
奥沙酮测试是一种化学测试,用于检测还原糖。这个测试甚至允许根据复合物出现的时间来区分不同的还原糖。该测试也被称为苯基肼测试,这是基于该测试所用的试剂。
奥沙酮试验的目的
- 检测还原糖。
- 区分还原糖和非还原糖。
- 来区分不同的还原糖。
奥沙宗试验原理
- 本试验的试剂为醋酸缓冲液中的苯肼。
- 本试验基于这样一个事实:含游离或潜在游离羰基的碳水化合物与苯肼反应生成安全氮。
- 苯肼和碳一的三个分子以及醛糖和酮糖的两个分子之间的缩合-氧化-缩合反应生成1,2-二苯基腙,即众所周知的osazone。
图:一种典型的反应,显示了一种氧腙的形成。D-葡萄糖与苯肼反应生成葡萄糖氮酮。图像来源:Shoyrudude555.
- Osazone呈黄色晶体,具有特征形状、溶解性、熔点和形成时间。对于不同的糖,Osazone是不同的。
- 由于碳1和碳2都参与了反应,因此C-2差向异构体产生相同的osazone。
- 类似地,构型与C-2以下醛糖相同的酮糖产生相同的糖带,例如葡萄糖和果糖。
需求
试剂
- 奥沙宗混合物:0.5克苯肼盐酸盐和0.1克醋酸钠。
- 冰醋酸
- 检测样本
所需材料
- 试管
- 试管架
- 微量加样器
装备
- 涡
- 水浴
- 显微镜
奥扎酮试验程序
- 在干净、干燥的试管中取5ml试液。
- 向试管中加入0.3g的osazone混合物和五滴冰醋酸。
- 如果需要溶解所有元素,将其充分混合并在水浴中轻轻加热试管。
- 将试管放在沸水中,观察不同时间点晶体的形成。
- 在低倍显微镜下观察晶体的形状。
奥沙宗试验结果及解释
- 根据晶体的形状和结构及其出现时间,可以识别不同的糖。
- 以下是通过该测试鉴定还原糖的图表:
碳水化合物 | 形成时间(分钟) | 晶体结构 |
果糖 | 2. | 针的形状 |
葡萄糖 | 5. | 针的形状 |
半乳糖 | 20 | 带刺球状 |
麦芽糖 | 30-45 | 向日葵/星形 |
乳糖 | 30-45 | 棉球/粉扑型 |
- 因此,通过这张表,可以根据晶体的结构和出现的时间来识别不同的糖。
图像来源:https://dx.doi.org/10.18535/jmscr/v4i12.14
使用奥沙酮测试
- 本试验是在鉴定未知糖时唯一可用于区分乳糖和麦芽糖的试验。
- 这是一种简单、廉价且相对耗时较少的测试,用于识别和区分临床实践中遇到的不同糖。
- 该测试也可用于定位植物组织中的糖。
奥沙宗试验的局限性
- 如果将蔗糖煮沸30分钟或更长时间,即使蔗糖是非还原糖,本试验也给出了蔗糖的阳性结果。
- 如果样品含有不同糖的混合物,则该试验无效。
- 同样的,大量的糖需要一个积极的结果。
参考资料和来源
- Tiwari A.(2015年)。实用生物化学。LAP Lambert学术出版公司。
- 沙,光辉。(2016).奥沙酮试验在糖鉴定中的应用。医学科学与临床研究。04。14361 - 14365。10.18535 / jmscr / v4i12.14。
- 4%——https://www.researchgate.net/publication/313745155_Practical_Biochemistry_A_Student_Companion
- 2% – https://diabetestalk.net/blood-sugar/glucose-and-fructose-can-be-distinguished-by-which-test
- 1% – https://www.slideshare.net/namarta28/qualitative-tests-for-carbohydrates-35884145
- 1% – https://medicalstudyzone.com/osazone-test/
- 1%——http://bioimdc.byethost24.com/wp-content/uploads/2014/03/10.-OSAZONE.pptx