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硝普酸测试定义
硝普乳房检测是用于检测自由分子的生物化学测试氨基酸或者蛋白质中的半胱氨酸。由于半胱氨酸是结构中唯一含有游离-SH基团的氨基酸，因此该测试是对半胱氨酸的专门测试。然而，这项测试并不是针对蛋白质和氨基酸的，因为它可以检测酮类化合物。该测试是氨基酸的有色反应，氨基酸中的游离-SH基团与硝普试剂反应形成红色络合物。半胱氨酸和蛋氨酸是两个带-SH基团的氨基酸，但蛋氨酸分子中的-SH基团参与硫酯键，硫酯键很难断裂，本试验无法检测到。也可以用来区分半胱氨酸和半胱氨酸，因为半胱氨酸的检测结果为阳性，而半胱氨酸的检测结果为阴性。
硝普试验的目的
- 检测蛋白质溶液中氨基酸半胱氨酸的存在。
- 区分半胱氨酸和半胱氨酸的氨基酸。
- 检测尿液样品中半胱氨酸的存在并诊断胱素尿。
硝普乳房检测原理
该测试是基于检测溶液中由于-SH基团的降解而产生的自由硫原子。硝基普鲁士是由一个八面体的亚铁中心组成的络合阴离子，该中心被五个紧密结合的氰化物基团包围。当分子与硫原子结合时，会形成紫色或红色的络合物。强碱的作用释放出半胱氨酸分子中的SH基团。硫然后与硝普酸离子反应，形成红色化合物。有些蛋白质可能不会立即产生阳性结果，在这种情况下，溶液应该加热，因为这些蛋白质可能需要热凝固来释放-SH基团。
反应
半胱氨酸+ 2NaOH→丝氨酸+ Na2S + H2O
NA.2[Fe（CN）5没有]+钠2年代→Na4[Fe（CN）5nos]（红色彩色复合物）
要求
试剂
- 2%新鲜制备的硝普钠
- 浓缩氢氧化钠
- 样品（1％半胱氨酸）
所需的材料
- 试管
- 试管架
- 吸量管
- 水浴
硝普试验程序
- 将2ml氨基酸溶液或样品加入试管中。
- 在试管中加入0.5 ml新鲜制备的硝普钠并充分混合。
- 现在，加入0.5毫升浓缩的氢氧化钠。如果没有立即观察到阳性结果，试管可以在水浴中加热2分钟。
- 在试管中观察颜色的变化或有色复合物的形成。
硝普施试验的结果与解释
- 积极的结果:硝普试验的阳性结果由红色络合物的出现表示。颜色的形成证实了半胱氨酸的存在。
- 负面结果:硝普试验的阴性结果表明没有红色的溶液。这表明半胱氨酸的缺失。
硝普试验的用途
- 硝普检验是一种用于检测样品中半胱氨酸或含有半胱氨酸的蛋白质的分析试验。
- 这种检测也可用于诊断胱氨酸尿，因为尿液中存在半胱氨酸是该病的病理特征。
- 硝普测试还能检测出酮酸和酮类化合物血和尿液有助于确定程度酮尿和酮血症。
还读：尿液（酮尿酮）和酮酮的酮试验
硝普试验的局限性
- 测试没有给出一个阳性结果，因为蛋氨酸中的-SH基团不是游离的，因为它涉及硫酯连接。
- 一些蛋白质可能需要对-SH组的解放进行热凝聚。
参考
- Nigam s.c.和Omkar(2003)。实验动物生理学和生物化学。新时代国际有限公司新德里。
- D(2012)。生物化学。14版。学术出版商。加尔各答。
- 女子,a(2015)。实际的生物化学。兰伯特学术出版社。