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苏利文和麦卡锡的测试定义
苏利文和麦卡锡的测试是一种生化测试，用于检测氨基酸蛋氨酸或含蛋氨酸的蛋白质。本试验是针对蛋氨酸的一种特异性试验，对蛋氨酸具有高度的特异性，因为它对所有其他氨基酸均呈阴性结果。然而，甘氨酸测试结果呈阳性。这是一个理想的方法检测蛋氨酸，因为它是一个快速和简单的方法，即使发酵提取蛋氨酸。苏利文和麦卡锡的测试是一种蛋白质的颜色反应，通过用特定试剂产生特定的颜色来表明特定分子的存在。
苏利文和麦卡锡测试的目标
- 检测氨基酸蛋氨酸或含蛋氨酸的蛋白质的存在。
- 以区分蛋氨酸与其他含硫氨基酸，如半胱氨酸和胱氨酸。
苏利文原理和麦卡锡检验
苏利文和麦卡锡的试验是基于在酸化条件下硝普和蛋氨酸的碱性溶液之间的反应。当发现色氨酸和组氨酸在相似的条件下都能与硝普氨酸产生红色时，这项测试就被开发出来了。因此，在样品溶液中加入酸，以破坏酸水解过程中存在的任何色氨酸。同样地，已经说过，甘氨酸的添加消除了组氨酸的检测。在蛋氨酸的碱性溶液中加入硝普钠，然后酸化反应，得到红色。
需求
试剂
- 10%硝普酸钠
- 5 n氢氧化钠
- 6 n盐酸
- 2%甘氨酸
- 示例解决方案
所需的材料
- 水浴
- 冰浴
- 涡
- 试管
- 试管架
- 吸量管
苏利文和麦卡锡测试程序
- 在试管中加入几滴氢氧化钠到1ml的测试溶液中。
- 为此，加入几滴2%甘氨酸和10%硝普钠溶液。
- 然后将溶液放入涡流中混合2分钟。
- 然后将试管置于40°C的水浴中15分钟。
- 然后试管在冰水中冷却5分钟，然后加入0.5ml 6N HCl。
- 然后将内容物在涡流中混合，试管在室温下放置15分钟。然后进行观察。
苏利文与麦卡锡测验的结果与解释
- 积极的结果:阳性结果由红色的外观来表示。这表明存在蛋氨酸。
- 负面结果:阴性结果由红色的缺席表示。这表明蛋氨酸的缺乏。
苏利文和麦卡锡测验的应用
- Sullivan和McCarthy的试验被用于检测游离形式或蛋白质中的蛋氨酸。
- 当测试样品可以与标准蛋氨酸溶液相匹配时，可以对测试进行修改以进行定量。
限制
- 该测试可能会对商品亮氨酸给出阳性结果，因为它可能含有一些微量的蛋氨酸。
- 用蛋氨酸的标准溶液进行试验可能不会给出可重复性的结果。
参考文献
- D(2012)。生物化学。14版。学术出版商。加尔各答。
- 女子,a(2015)。实际的生物化学。兰伯特学术出版社。
- 麦卡锡和苏利文(1941年)。一种新的高特异性蛋氨酸比色试验方法。生物化学学报。635.
- 琼卡和丹顿(1946)。蛋白质和食品中蛋氨酸的测定。生物。1946年化学,163:329 - 338。